家蠶Prosβ1基因在蛾翅及早期發(fā)育中的作用
關(guān)鍵詞：家蠶 翅 發(fā)育 蛋白酶體
摘要：家蠶是鱗翅目的代表物種,研究其翅發(fā)育相關(guān)基因有助于理解影響昆蟲(chóng)翅發(fā)育的內(nèi)在因素,為鱗翅目害蟲(chóng)的遺傳防治提供理論基礎(chǔ)和靶標(biāo)。家蠶的蛋白酶體β亞基1(Bombyx mori proteasome subunitβtype-1,BmProsβ1)是家蠶蛋白酶體核心顆粒的組件之一,負(fù)責(zé)水解折疊錯(cuò)誤或細(xì)胞不需要的蛋白質(zhì),在細(xì)胞發(fā)育和器官形成過(guò)程中發(fā)揮重要作用。利用RNAi干擾技術(shù),在家蠶體腔翅原基附近注射體外合成的針對(duì)BmProsβ1基因的小RNA,qRT-PCR檢測(cè)試驗(yàn)組翅原基中BmProsβ1的表達(dá)水平得到有效抑制;對(duì)干擾后翅表型的統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,試驗(yàn)組中小翅個(gè)體的比率占52.38%,而對(duì)照組中未出現(xiàn)小翅個(gè)體。表明在BmProsβ1表達(dá)受到抑制的情況下,會(huì)嚴(yán)重影響家蠶翅的發(fā)育。進(jìn)一步利用CRISPR/Cas9技術(shù)對(duì)BmProsβ1進(jìn)行基因敲除實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示注射sgRNA與Cas9 mRNA的蠶卵孵化率極低并在幼蟲(chóng)期死亡,而對(duì)照組孵化率達(dá)到37.92%。這表明BmProsβ1基因在家蠶的早期發(fā)育過(guò)程中也起到重要作用,其功能缺失會(huì)導(dǎo)致家蠶胚胎和幼蠶致死。
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