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      茶樹(shù)CsMDHAR基因的克隆與非生物脅迫響應(yīng)分析

      林士佳; 李輝; 劉昊; 滕瑞敏; 劉婧愉; 王爽; 莊靜 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院; 茶葉科學(xué)研究所; 江蘇南京210095

      關(guān)鍵詞:茶樹(shù) csmdhar 抗壞血酸 非生物脅迫 啟動(dòng)子元件分析 

      摘要:基于茶樹(shù)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),以龍井43茶樹(shù)cDNA為模板,克隆得到開(kāi)放閱讀框(ORF)長(zhǎng)度為1 305 bp,編碼434個(gè)氨基酸的茶樹(shù)單脫氫抗壞血酸還原酶基因,命名為CsMDHAR。蛋白序列特征和基因表達(dá)模式分析表明,CsMDHAR蛋白含有FAD結(jié)合功能域,屬于FAD依賴的吡啶核苷酸-硫基氧化還原酶(Pyr-redox-2)家族。該蛋白有兩個(gè)無(wú)序化區(qū)域,而且包含有32個(gè)磷酸化位點(diǎn),理論相對(duì)分子量為47.21 kDa,pI為5.99,屬于親水性蛋白;CsMDHAR蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)以α-螺旋和隨機(jī)卷曲為主。通過(guò)PlantCARE和PLACE對(duì)啟動(dòng)子上游調(diào)控元件進(jìn)行分析預(yù)測(cè),結(jié)果顯示,CsMDHAR基因啟動(dòng)子上游1 000 bp中含有多個(gè)與光、激素以及植物抗逆有關(guān)的順式作用元件。利用熒光定量PCR方法檢測(cè)龍井43和迎霜的CsMDHAR、CsAO和CsAPX在4種不同非生物脅迫下的表達(dá)水平,結(jié)果表明,在低溫(4℃)脅迫下,兩個(gè)茶樹(shù)品種的CsMDHAR、CsAO和CsAPX的表達(dá)均受抑制,且品種間的差異較小;在高溫(38℃)和干旱(200 g·L^-1 PEG)脅迫下龍井43中的CsMDHAR表達(dá)均上調(diào),分別在8 h和2 h時(shí)達(dá)到最大值,為對(duì)照的1.49倍和1.85倍;鹽(200 mmol·L^-1 NaCl)脅迫下,CsAO和CsAPX在兩種茶樹(shù)品種中的表達(dá)量變化趨勢(shì)相似,但變化幅度不同,可能與品種間不同的抗逆性有關(guān)。

      茶葉科學(xué)雜志要求:

      {1}有參考文獻(xiàn),專(zhuān)著的格式為:主要責(zé)任者.題名[文獻(xiàn)類(lèi)型標(biāo)志].出版地:出版者,出版年:引文頁(yè)碼,文獻(xiàn)的格式為主要責(zé)任者.文獻(xiàn)題名[文獻(xiàn)類(lèi)型標(biāo)志].連續(xù)出版物題名,年,卷(期):頁(yè)碼。

      {2}中圖分類(lèi)號(hào)按《中國(guó)圖書(shū)館分類(lèi)法》(第4版)標(biāo)引分類(lèi)號(hào)。

      {3}摘要與關(guān)鍵詞采用第三人稱(chēng)表述,內(nèi)容應(yīng)包括研究目的、方法和具體的研究結(jié)果、結(jié)論以及重要的數(shù)據(jù),中文摘要字?jǐn)?shù)200~300字,中英文摘要文意一致,英文摘要參考Ei摘要寫(xiě)作要求。

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      茶葉科學(xué)

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      預(yù)計(jì)1-3個(gè)月審稿

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