團(tuán)頭魴NOS2基因的克隆和組織表達(dá)分析
關(guān)鍵詞：組織表達(dá)
摘要：為了探究誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)在嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)感染團(tuán)頭魴(Megalobrama amblycephala)時發(fā)揮的作用,克隆并分析了團(tuán)頭魴NOS2基因。結(jié)果顯示,NOS2基因的cDNA序列全長4 215 bp,編碼1 080個氨基酸。氨基酸序列同源性分析表明,團(tuán)頭魴NOS2基因與草魚NOS2基因的相似性最高,達(dá)95%。進(jìn)化關(guān)系分析表明,團(tuán)頭魴NOS2基因與鯉科魚類NOS2基因聚在一支。實(shí)時熒光定量PCR檢測的結(jié)果表明,在嗜水氣單胞菌感染團(tuán)頭魴后,NOS2基因在肝臟和頭腎中被誘導(dǎo)表達(dá);在脾臟中NOS2基因在3 h被誘導(dǎo)表達(dá),其余時間點(diǎn)表達(dá)量顯著下調(diào);在腸道組織中NOS2基因在3 h下調(diào)表達(dá),在6 h有微弱的上調(diào),之后趨于穩(wěn)定。研究結(jié)果為進(jìn)一步探索NOS2基因在嗜水氣單胞菌感染團(tuán)頭魴后免疫應(yīng)答中發(fā)揮的作用打下基礎(chǔ)。
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