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血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子定量檢測(cè)試劑盒的研制
關(guān)鍵詞：血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子類 試劑盒 抗體 單克隆
摘要：目的 研制血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）檢測(cè)試劑盒（酶標(biāo)法）.方法 以一株特異性抗VEGF單克隆抗體作為捕獲抗體,另一株單克隆抗體作為檢測(cè)抗體,通過(guò)棋盤滴定法確定兩抗體的最佳濃度組合.制備凍干VEGF165參考品,并對(duì)樣本稀釋液、封閉液等實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化.檢測(cè)自制試劑盒的特異性并對(duì)其進(jìn)行初步應(yīng)用.結(jié)果 棋盤滴定法確定捕獲抗體的質(zhì)量濃度為10μg/ml,檢測(cè)抗體的稀釋倍數(shù)為1：20 000.凍干VEGF165的質(zhì)量濃度為720～880 pg/ml,樣本間變異系數(shù)〈10%.以5%牛血清白蛋白作為封閉液和樣本稀釋液最為合適.自制試劑盒與10種細(xì)胞因子均無(wú)交叉反應(yīng),具有較高的特異性和靈敏度.結(jié)論 成功研制出VEGF檢測(cè)試劑盒.
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