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可誘導(dǎo)性表達呼吸道合胞病毒蛋白細胞系的快速構(gòu)建方法研究
關(guān)鍵詞：呼吸道合胞病毒 piggybac轉(zhuǎn)座子 誘導(dǎo)性表達 細胞系構(gòu)建
摘要：目的研發(fā)用以快速構(gòu)建多種可誘導(dǎo)性表達呼吸道合胞病毒（RSV）蛋白的細胞系創(chuàng)新性的技術(shù)路線。方法將不同的RSV病毒蛋白基因分別連接到含有PiggyBac轉(zhuǎn)座子位點的Cumate誘導(dǎo)表達載體上，與PiggyBac轉(zhuǎn)座酶質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染HEK293細胞，利用嘌呤霉素進行篩選，并用Cumate誘導(dǎo)病毒蛋白表達。結(jié)果流式細胞儀及Westernblot檢測結(jié)果均表明，加入誘導(dǎo)劑Cumate后，篩選的細胞系中開始表達相應(yīng)的病毒蛋白，提示細胞系構(gòu)建成功。結(jié)論利用PiggyBac轉(zhuǎn)座子可以高效率的構(gòu)建誘導(dǎo)性表達RSV病毒蛋白的細胞系。
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