大腸桿菌角鯊烯合成途徑的構(gòu)建與調(diào)控
關(guān)鍵詞：大腸桿菌 角鯊烯 異戊二烯途徑 代謝調(diào)控 培養(yǎng)條件優(yōu)化
摘要：角鯊烯因其具有良好的抗氧化功能而被廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化妝品、工業(yè)應(yīng)用等領(lǐng)域。本實(shí)驗(yàn)在大腸桿菌中構(gòu)建角鯊烯合成途徑,通過對(duì)其合成途徑中關(guān)鍵限速酶(1-脫氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶和異戊烯基二磷酸異構(gòu)酶)過表達(dá)的方法進(jìn)行初步調(diào)控,使角鯊烯的產(chǎn)量提升了近三倍。之后采用單因素試驗(yàn)對(duì)其發(fā)酵培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化,以此來提高角鯊烯的產(chǎn)量。優(yōu)化發(fā)酵條件后,使用最優(yōu)發(fā)酵培養(yǎng)基——TB培養(yǎng)基,在最佳發(fā)酵條件:37℃,220r/min培養(yǎng)至OD600約為1.2時(shí)加入終濃度為0.1mmol/L的IPTG誘導(dǎo)劑,25℃條件下誘導(dǎo)48h,角鯊烯產(chǎn)量可達(dá)73.88mg/L。
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