輪狀病毒Rotateq及Rotarix疫苗VP8^*蛋白的原核表達(dá)、純化與鑒定
關(guān)鍵詞：輪狀病毒 rotateq疫苗 rotarix疫苗 原核表達(dá)
摘要：目的 :通過(guò)大腸埃希菌原核表達(dá)體系,分別獲得輪狀病毒疫苗Rotateq及Rotarix的VP8*基因表達(dá)產(chǎn)物,為深入研究輪狀病毒VP8*蛋白的結(jié)構(gòu)和功能奠定基礎(chǔ)。方法 :基因合成輪狀病毒疫苗Rotateq及Rotarix的P[8]型VP8*基因序列,將其克隆到攜帶有GST標(biāo)簽的pGEX-4T1表達(dá)載體中構(gòu)建重組質(zhì)粒pGEX-4T1-VP8*,測(cè)序正確后轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物,并通過(guò)Glutathione Sepharose 4B純化柱進(jìn)行純化,Western Blot鑒定。結(jié)果 :SDS-PAGE電泳結(jié)果顯示分子量52KD處有深染帶,Western-Blot顯示該處蛋白能與GST標(biāo)簽抗體結(jié)合。結(jié)論 :成功構(gòu)建了包含Rotateq及Rotarix VP8*基因的重組表達(dá)載體pGEX-4T1-VP8*,獲得了可溶性GST-VP8*重組蛋白。
湖南師范大學(xué)學(xué)報(bào)·醫(yī)學(xué)版雜志要求:
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