穿膜肽TAT和R9的生物學(xué)效應(yīng)的體內(nèi)體外研究
關(guān)鍵詞：細(xì)胞穿膜肽 穿膜效率 活體穿膜
摘要：本文比較了兩種常用穿膜肽TAT和R9的體外穿膜效率、對(duì)細(xì)胞影響以及小鼠活體內(nèi)不同器官的穿膜效率。非特異性穿膜肽TAT和R9分別為11個(gè)氨基酸和9個(gè)氨基酸的短肽,能夠有效地穿過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞。本研究純化制備出融合蛋白TAT-EGFP及R9-EGFP多肽,用相同濃度的活性TAT-EGFP和R9-EGFP處理肺癌細(xì)胞,觀察比較二者的穿膜活性及效率;設(shè)置不同濃度梯度檢測(cè)兩種穿膜肽是否對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生影響;通過(guò)小鼠腹腔注射TAT-EGFP和R9-EGFP活性肽段,研究二者在活體能夠穿膜到達(dá)的靶位置,并比較分析二者穿膜的效果器官分布。結(jié)果顯示制備獲得的兩種融合蛋白TAT-EGFP和R9-EGFP均能有效穿過(guò)實(shí)現(xiàn)穿膜功能,兩種穿膜肽對(duì)乳腺癌細(xì)胞影響較小?；铙w試驗(yàn)證明兩種穿膜肽在心、肝、脾、肺、腎器官均有分布,R9主要富集在小鼠的腎和肝臟中,TAT在6種被研究的器官都有富集,兩種細(xì)胞穿膜肽都能透過(guò)血腦屏障到達(dá)腦部。相對(duì)來(lái)說(shuō),TAT在小鼠活體中的穿膜效果更好,熒光富集多,R9整體穿膜效果較弱。本研究分析比較了兩種穿膜肽的細(xì)胞安全性濃度和活體的穿膜能力,為T(mén)AT和R9兩種穿膜肽在后續(xù)試驗(yàn)中的合理有效的選擇和使用,提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和指導(dǎo)性依據(jù)。
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