小麥TaGAPDH5基因的亞細(xì)胞定位和表達(dá)分析
關(guān)鍵詞：小麥 tagapdh5 亞細(xì)胞定位 表達(dá)分析
摘要：利用生物信息學(xué)方法預(yù)測中國春小麥TaGAPDH5的理化性質(zhì)、亞細(xì)胞定位等分子特征,發(fā)現(xiàn)該蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量為31 541.87,理論等電點(diǎn)(pI)為6.08,為酸性親水性蛋白,沒有信號(hào)肽和跨膜結(jié)構(gòu)域.采用基因槍法將TaGAPDH5-GFP融合載體瞬時(shí)轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)TaGAPDH5分布于細(xì)胞質(zhì).通過PLEXdb和Genevestigator數(shù)據(jù)庫下載中國春小麥幼苗、分蘗、拔節(jié)等生育期的芯片表達(dá)數(shù)據(jù),構(gòu)建TaGAPDH5的芯片表達(dá)譜,發(fā)現(xiàn)TaGAPDH5在小麥整個(gè)生長周期均持續(xù)較高水平表達(dá)且具有一定組織特異性.采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)技術(shù)研究其不同時(shí)期的組織表達(dá)特性,發(fā)現(xiàn)TaGAPDH5從孕穗期到開花期,在同一時(shí)期的不同組織中和不同發(fā)育時(shí)期的同一組織中表達(dá)差異較大.通過構(gòu)建誘導(dǎo)表達(dá)譜,發(fā)現(xiàn)TaGAPDH5基因能響應(yīng)多種非生物脅迫.因此推測TaGAPDH5在小麥生長發(fā)育過程中發(fā)揮重要作用.
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