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      K亞群禽白血病病毒多克隆檢測(cè)抗體的制備和特性分析

      王呈呈; 冉英; 肖雅之; 李涵; 胡衛(wèi)國(guó); 邱建華; 李宏梅; 郭慧君 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院; 山東省動(dòng)物生物工程與疾病防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 山東泰安271018

      關(guān)鍵詞:k亞群禽白血病病毒 gp85基因 多克隆抗體 

      摘要:為制備識(shí)別K亞群禽白血病病毒(ALV-K)兔源多克隆抗體,將含ALV-K gp85基因的表達(dá)質(zhì)粒在大腸桿菌體內(nèi)進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),獲得含his標(biāo)簽的大小為55KD的重組蛋白;將純化后的表達(dá)蛋白免疫接種5只青年兔,三次加強(qiáng)免疫后檢測(cè)收獲血清抗體,ELISA檢測(cè)血清抗體效價(jià);對(duì)血清抗體進(jìn)行純化并檢測(cè)抗體亞型,Western-blot和IFA檢測(cè)抗體對(duì)ALV-Kgp85蛋白和病毒識(shí)別特性。結(jié)果表明,獲得的抗體效價(jià)達(dá)到8×107,抗體亞型為IgG2b,該抗體能夠特異性識(shí)別ALV-K gp85蛋白和DF1細(xì)胞中的ALVK病毒,可以用于IFA臨床檢測(cè),為K亞群禽白血病的快速檢測(cè)奠定了基礎(chǔ)。

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