嗜熱脂肪芽孢桿菌( Geobacillus stearothermophilus )來源耐熱β-半乳糖苷酶BgaB轉(zhuǎn)糖苷催化活性改造
關(guān)鍵詞：低聚半乳糖 轉(zhuǎn)糖苷活性 嗜熱脂肪芽孢桿菌 定點(diǎn)突變 化學(xué)修飾
摘要：該研究以GH42家族嗜熱脂肪芽孢桿菌(Geobacillus stearothermophilus)來源耐熱β-半乳糖苷酶BgaB為研究對象,針對其轉(zhuǎn)糖苷活性弱的問題,采用定點(diǎn)突變與化學(xué)修飾相結(jié)合的方法,對其預(yù)測親核催化位點(diǎn)Glu303進(jìn)行了功能研究與分子改造。所得突變體Ox-E303C與野生型酶相比,可將低聚半乳糖合成量由0%提高到11.5%。研究結(jié)果表明對耐熱β-半乳糖苷酶BgaB親核催化位點(diǎn)進(jìn)行半胱氨酸亞磺酸(—SOO-)替換,能夠提高其轉(zhuǎn)糖苷催化活性。該研究對GH42家族β-半乳糖苷酶轉(zhuǎn)糖苷催化功能的分子改造具有廣泛的參考價(jià)值。
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