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酶高效表達體系構建及高通量篩選關鍵技術
關鍵詞：酶分子高效表達 菌株構建 高通量篩選技術
摘要：酶作為生物催化劑已被廣泛地應用于醫(yī)藥、食品、化工、能源及輕工業(yè)等領域,隨著低碳經濟發(fā)展及綠色制造的發(fā)展需求,酶制劑應用領域不斷拓展。隨著當今生命科學前沿技術飛速發(fā)展,生物信息學、分子進化、基因組學和蛋白質組學等先進技術被應用于新酶分子的挖掘與改造。而代謝工程及反應過程工程成為酶制劑發(fā)酵生產調控的關鍵。同時,酶制劑高效表達菌株及其高通量篩選技術平臺的構建也是新酶發(fā)現與工業(yè)化生產的重要橋梁。本文從酶高效表達載體和宿主出發(fā),重點介紹了高效表達體系的構建原理和方法,包括重組酶表達載體表達元件的優(yōu)化、重組酶基因表達量的增加、提高酶蛋白質的折疊通量、優(yōu)化蛋白分泌運輸途徑、降低蛋白降解途徑的作用、初級代謝途徑的優(yōu)化等。還總結了高效菌株的篩選方法,并展開合理預測。
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