響應(yīng)面法優(yōu)化重組大腸桿菌產(chǎn)谷氨酸脫氫酶培養(yǎng)基的研究
關(guān)鍵詞：谷氨酸脫氫酶 響應(yīng)面分析 培養(yǎng)基優(yōu)化
摘要：通過響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法對(duì)重組大腸桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化,提高胺化還原反應(yīng)工藝制備L-草銨膦中關(guān)鍵生物催化劑谷氨酸脫氫酶的生產(chǎn)能力。首先通過單因素實(shí)驗(yàn)篩選發(fā)酵培養(yǎng)基最適的碳源、氮源,并用Plackett-Burman設(shè)計(jì)確定發(fā)酵培養(yǎng)基各成分對(duì)產(chǎn)酶的影響程度。然后根據(jù)Box-Bohnken的中心組合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面分析確定最佳的培養(yǎng)基成分組合。優(yōu)化后的培養(yǎng)基組成為:甘油11.3g/L,安琪酵母粉90516.28g/L,MgSO4·7H2O0.63g/L,Na2HPO4·12H2O17.1g/L,KH2PO43g/L,NH4Cl1.5g/L,NaCl0.5g/L。采用優(yōu)化后發(fā)酵培養(yǎng)基獲得的谷氨酸脫氫酶對(duì)2-羰基-4-(羥基甲基膦?；?丁酸(PPO)的催化活力為129.1U/mL,是LB培養(yǎng)基的2.58倍,顯著降低了酶催化劑的制備成本。
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