同種異體軟骨脫細(xì)胞基質(zhì)在關(guān)節(jié)軟骨缺損中的應(yīng)用研究
關(guān)鍵詞：關(guān)節(jié)軟骨缺損 軟骨再生
摘要：目的:探索使用同種異體軟骨脫細(xì)胞基質(zhì)( DCM)修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的效果及可能機(jī)制。方法:原代培養(yǎng)新西蘭大白兔耳軟骨細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞( BMMSCs),軟骨細(xì)胞擴(kuò)增后誘導(dǎo)形成軟骨細(xì)胞膜片,將細(xì)胞膜片脫細(xì)胞處理后制作為DCM,冷凍干燥備用。將BMMSCs 附和在DCM 表面共培養(yǎng),SEM 觀察材料微觀形態(tài)以及BMMSCs 與材料的附和情況。qPCR檢測(cè)DCM 對(duì)BMMSCs 軟骨向分化的影響。使用同種異體DCM 修復(fù)兔膝關(guān)節(jié)軟骨缺損,3個(gè)月后使用HE 染色和免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)缺損修復(fù)效果。結(jié)果:成功培養(yǎng)出復(fù)層軟骨細(xì)胞膜片并制作出DCM;在SEM 下觀察可見BMMSCs 與DCM結(jié)合良好;并發(fā)現(xiàn)DCM 可誘導(dǎo)BMMSCs 分泌細(xì)胞外基質(zhì)。qPCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)DCM 促進(jìn)BMMSCs 表達(dá)COL-II 和SOX-9 表達(dá),抑制COL-I 和COL-X 表達(dá),不影響Aggrecan 表達(dá)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示DCM + BMMSCs 組關(guān)節(jié)軟骨缺損的修復(fù)程度優(yōu)于對(duì)照組。結(jié)論:同種異體DCM 可能是通過SOX-9 通路誘導(dǎo)BMMSCs 的軟骨向分化,促進(jìn)軟骨缺損的修復(fù)。
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