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敲降胰高血糖素基因對胰島素瘤形成的影響
關鍵詞：胰島素瘤 胰島素 葡萄糖 胰高血糖素
摘要：目的通過體外培養(yǎng)的胰島素瘤細胞和胰島素瘤動物模型,探討敲降胰高血糖素基因對胰島素瘤形成的影響。方法通過免疫熒光染色,激光共聚焦顯微鏡觀察INS-1細胞胰島素和胰高血糖素蛋白的表達,應用慢病毒pLVTHM-glucagon敲降INS-1細胞的胰高血糖素基因,建立胰高血糖素低表達的INS-1細胞系,將細胞分成空白對照組(不進行感染)、單純轉染慢病毒組(感染pLVTHM)和敲降胰高血糖素組(感染pLVTHM-shglucagon)。 MTT法比較敲降胰高血糖素后INS-1細胞增殖能力、ELISA法和放射免疫分析法觀察胰島素和胰高血糖素的釋放能力。將3組細胞分別移植到胰島素瘤模型裸鼠左腎包膜下,觀察細胞成瘤能力,并通過免疫組織化學染色法觀察腫瘤組織中胰島素和胰高血糖素的表達。結果與空白對照組和單純轉染慢病毒組相比,敲降胰高血糖素組的INS-1細胞增殖能力減弱,葡萄糖刺激的胰島素分泌功能無明顯變化,但胰高血糖素分泌明顯減少;與單純轉染慢病毒組相比,敲降胰高血糖素組細胞移植到裸鼠腎包膜下時,細胞成瘤速度明顯降低;免疫組織化學染色結果顯示此胰島素瘤組織胰高血糖素表達明顯下調。結論敲降胰高血糖素基因可抑制胰島素瘤細胞的增殖和胰高血糖素的釋放,從而抑制胰島素瘤的形成,提示胰高血糖素基因表達可能是胰島素瘤發(fā)生的一個重要機制。
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