矮牽牛PhUGT74E2基因的克隆及對逆境脅迫的響應(yīng)
關(guān)鍵詞：矮牽牛 ugt74e2 啟動子 干旱脅迫 鹽脅迫
摘要：糖基化轉(zhuǎn)移酶(UGTs)能夠維持植物體內(nèi)的激素平衡,廣泛參與植物的生長發(fā)育及逆境脅迫應(yīng)答。該研究從矮牽牛(Petunia hybrida var. Mitchel diploid)中克隆了UGT74E2的同源基因PhUGT74E2及其啟動子序列,并分析了序列特征和蛋白結(jié)構(gòu)特點,同時采用qRT-PCR對該基因在不同組織、不同逆境脅迫下的轉(zhuǎn)錄水平進行了檢測,以探討矮牽牛UGT74E2基因的功能,為揭示其調(diào)控矮牽牛抗逆性的分子機制奠定基礎(chǔ)。結(jié)果顯示:(1)成功克隆獲得矮牽牛UGT74E2基因全長序列,命名為PhUGT74E2。(2)PhUGT74E2基因cDNA全長1 986 bp,包含一個1 347 bp開放閱讀框,編碼448個氨基酸;其蛋白分子式為C2278H3544N586O676S18,分子量為50.53 kDa,等電點為5.18;PhUGT74E2無信號肽和跨膜域,主要定位于葉綠體;同時克隆了PhUGT74E2基因上游2 083 bp啟動子序列,該序列中含有脫落酸、赤霉素、光及逆境等響應(yīng)元件。(3)系統(tǒng)進化樹分析顯示,PhUGT74E2與其他物種UGT74E2起源相同,而與煙草NtUGT74E2的親緣關(guān)系最近。(4)熒光定量PCR分析表明,PhUGT74E2基因在葉片、莖、根、葉腋和頂端5個組織中均有表達,其中葉腋中的表達量最高,而莖和根中的表達量最低;PEG6000模擬干旱處理及NaCl處理均引起了PhUGT74E2表達水平的顯著上調(diào),且隨著時間的延長表達水平相應(yīng)增加,說明PhUGT74E2能夠參與矮牽牛對干旱及鹽脅迫的響應(yīng)。
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