美洲大蠊粉酶解工藝最佳用酶初步篩選
關(guān)鍵詞：美洲大蠊粉 蛋白酶 水解度 mtt法
摘要：目的:分別用4種蛋白酶對美洲大蠊粉超聲提取液基于半仿生環(huán)境進(jìn)行酶解,制備不同類型多肽,并采用MTT法篩選出抑制乳腺癌MCF-7細(xì)胞的最佳用酶。方法:分別用胃蛋白酶、彈性蛋白酶、胰蛋白酶及胰凝乳蛋白酶對美洲大蠊粉進(jìn)行酶解,采用苯并戊三酮顯色法和半微量凱氏定氮法測定不同酶解液的水解度;使用MTT法進(jìn)行體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)。以乳腺癌MCF-7細(xì)胞的抑制率為指標(biāo),水解度為參考,評(píng)價(jià)4種蛋白酶對美洲大蠊粉的酶解效果并篩選出最佳用酶。結(jié)果:胃蛋白酶、彈性蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶對美洲大蠊粉的水解度分別為3.35%、13.30%、12.89%、7.74%。無酶對照組、胰蛋白酶組、胰凝乳蛋白酶組IC50依次為1.396、0.724、0.402 mg/mL;胃蛋白酶和彈性蛋白酶組因抑制效果不穩(wěn)定而舍去。結(jié)論:在綜合酶解能力和抑瘤能力方面,胰蛋白酶為美洲大蠊粉酶解工藝的最佳用酶,胰凝乳蛋白酶次之。
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