建立檢測瘧疾的微滴數(shù)字PCR方法
趙明惠; 吳健; 王寧; 韓穎; 劉偉; 徐鐵龍; 張強; 冉鑫 江西國際旅行衛(wèi)生保健中心; 江西南昌330002; 廣東國際旅行衛(wèi)生保健中心; 上海之江生物科技股份有限公司; 江西省疾病預(yù)防控制中心
關(guān)鍵詞：微滴數(shù)字pcr 瘧疾 數(shù)字pcr 熒光定量pcr
摘要：目的建立適合口岸瘧疾檢測的微滴數(shù)字PCR方法。方法根據(jù)文獻中檢測瘧原蟲的特異性引物和探針,建立檢測瘧疾的微滴數(shù)字PCR方法,與普通PCR及熒光定量PCR進行比較,評估微滴數(shù)字PCR的優(yōu)越性。結(jié)果微滴數(shù)字PCR檢測下限為0.721ng/μl,靈敏度比普通PCR高10倍,與熒光定量PCR相當(dāng);微滴數(shù)字PCR的重復(fù)性高于普通PCR,但不如熒光定量PCR穩(wěn)定。檢測的準確性方面,普通PCR對37份已知樣本的檢測準確率為75.68%,微滴數(shù)字PCR和熒光定量PCR均能達到100.00%。結(jié)論建立了檢測瘧疾的微滴數(shù)字PCR方法,比普通PCR方法靈敏度、重復(fù)性及準確性均有很大優(yōu)勢。
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