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抗牛傳染性鼻氣管炎病毒gD蛋白中和活性單克隆抗體的制備及鑒定
關(guān)鍵詞：牛傳染性鼻氣管炎病毒 gd蛋白 單克隆抗體
摘要：為了制備牛傳染性鼻氣管炎病毒(IBRV)gD蛋白的單克隆抗體,本研究用純化的IBRV免疫BALB/c小鼠,然后以純化的昆蟲細(xì)胞表達(dá)的gD蛋白作為ELISA包被抗原篩選雜交瘤細(xì)胞株。結(jié)果獲得3株能夠穩(wěn)定分泌抗gD蛋白單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株1B4、3E8和4F12。采用夾心ELISA鑒定單克隆抗體的Ig亞類,結(jié)果顯示,1B4、3E8為IgG2b,4F12為IgG1。免疫印跡試驗(yàn)與間接免疫熒光試驗(yàn)表明,3株單克隆抗體均能與IBRV發(fā)生特異性反應(yīng)。微量中和試驗(yàn)結(jié)果顯示,1B4和3E8單克隆抗體具有中和IBRV的活性,中和效價(jià)均為1∶320。本研究成功制備了具備中和作用的抗牛傳染性鼻氣管炎病毒gD蛋白單克隆抗體,為建立特異性的IBRV診斷方法及致病機(jī)理的研究提供了工具。
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