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雞源產(chǎn)氣莢膜梭菌重組酶聚合酶擴增檢測方法的建立
關鍵詞：產(chǎn)氣莢膜梭菌 重組酶聚合酶擴增技術 熒光定量檢測 雞壞死性腸炎
摘要：為建立雞源產(chǎn)氣莢膜梭菌(Clostridium perfringens)的快速診斷方法,本研究以產(chǎn)氣莢膜梭菌α-毒素的編碼基因plc為基礎設計、合成引物和探針,并以real-time PCR的方法進行驗證,建立了雞源產(chǎn)氣莢膜梭菌的重組酶聚合酶擴增(RPA)檢測方法。該方法可在38℃、25 min內(nèi)對產(chǎn)氣莢膜梭菌的α-毒素編碼序列進行快速特異性擴增,最低檢測限量可達1×10^1copies/μL,靈敏度良好。以此方法檢測實驗室保存的臨床樣本,其檢測結果與real-time PCR的檢測結果一致。上述結果表明,本研究建立的real-time RPA方法在檢測雞源產(chǎn)氣莢膜梭菌時具有操作簡單、快速靈敏的特點,適用于雞源產(chǎn)氣莢膜梭菌的臨床檢測。
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