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鹿流行性出血熱病毒實時熒光RT-RPA檢測方法的建立
關鍵詞：鹿流行性出血熱病毒 快速檢測
摘要：為建立一種快速檢測鹿流行性出血熱病毒(EHDV)的實時熒光RT-RPA檢測方法,本研究根據(jù)EHDV保守的非結構蛋白NS1基因(segment 5)設計特異性引物和探針,建立了敏感、快速的EHDV核酸實時熒光RT-RPA檢測方法。結果顯示,該方法特異性強,能準確檢測EHDV核酸,與藍舌病病毒(BTV)、牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)等病原核酸無交叉反應;敏感性高,本試驗中最低可檢測到8×10~1copies/μL;檢測時間短,僅需15 min;重復性好。采用所建立方法對115份樣品進行檢測,結果與OIE推薦的實時熒光RT-PCR法檢測結果相同。上述結果表明,本研究建立的實時熒光RT-RPA快速檢測法操作簡便,可用于基層實驗室快速檢測。
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