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下調(diào)NPM基因表達對慢性髓系白血病細胞株K562增殖的抑制作用研究
關(guān)鍵詞：核仁磷酸蛋白 慢性髓系白血病細胞 細胞增殖 細胞周期
摘要：目的:運用RNA干擾技術(shù)抑制核仁磷酸蛋白(NPM)的表達,研究NPM基因在慢性髓系白血病細胞株(K562細胞)增殖中的作用及其機制。方法:采用shRNA抑制NPM的表達,應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測NPM基因的表達,MTS法檢測抑制NPM基因?qū)毎鲋衬芰Φ挠绊?流式細胞術(shù)檢測細胞周期的改變,Western blot檢測細胞周期相關(guān)蛋白的表達。結(jié)果:成功構(gòu)建了針對NPM基因的shRNA慢病毒載體,并感染K562細胞。檢測結(jié)果顯示,與對照組相比較,抑制K562細胞NPM基因的表達可以抑制細胞的增殖,減少細胞集落形成。干擾NPM基因可使G0/G1期延長,細胞周期阻滯,這可能與下調(diào)NPM基因后激活p21蛋白的表達,進而抑制CDK2/CyclinE復(fù)合物形成有關(guān)。結(jié)論:下調(diào)K562細胞NPM基因的表達,可以通過誘導(dǎo)細胞周期阻滯抑制K562細胞的增殖。
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