兒童乳牙牙髓干細(xì)胞順硬度基質(zhì)表面延展和向牙本質(zhì)分化的潛能
關(guān)鍵詞：牙髓干細(xì)胞 牙本質(zhì) 細(xì)胞遷移 細(xì)胞分化 牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1
摘要：背景:牙髓干細(xì)胞在適宜誘導(dǎo)條件下能夠向牙本質(zhì)分化,是牙齒組織工程的重要種子細(xì)胞。然而,以往所使用的誘導(dǎo)劑多為化學(xué)制劑,不利于體內(nèi)應(yīng)用。近來有報(bào)道稱間充質(zhì)干細(xì)胞能夠順材質(zhì)硬度分化,這種由物理特性誘導(dǎo)的細(xì)胞分化研究報(bào)道較少。目的:觀察人源性乳牙牙髓干細(xì)胞在硬介質(zhì)表面的延展特點(diǎn)及向牙本質(zhì)分化潛能,為牙組織工程提供參考。方法:原代分離培養(yǎng)和鑒定兒童自然脫落的乳牙牙髓干細(xì)胞;使用低熔點(diǎn)瓊脂糖配制彈性模量為(9.12±0.94),(27.18±3.55),(59.37±4.05)和(86.45±5.33)k Pa4個(gè)梯度的固體凝膠基質(zhì),二維克隆形成實(shí)驗(yàn)和劃痕實(shí)驗(yàn)檢測第4代乳牙牙髓干細(xì)胞在上述硬基質(zhì)表面的延展能力,Western blot方法檢測牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1、牙本質(zhì)磷蛋白、牙本質(zhì)涎蛋白的表達(dá)。結(jié)果與結(jié)論:當(dāng)人乳牙牙髓干細(xì)胞接種于極低和低等硬度凝膠介質(zhì)表面時(shí),乳牙牙髓干細(xì)胞幾乎均以邊緣整齊的細(xì)胞克隆存在,很少見細(xì)胞平鋪和延展現(xiàn)象;但是當(dāng)將其接種于中等和高等硬度凝膠介質(zhì)表面時(shí),乳牙牙髓干細(xì)胞克隆邊緣則表現(xiàn)出明顯的平鋪和延展,表現(xiàn)為細(xì)胞胞體變大,細(xì)胞邊緣外伸明顯。相似的現(xiàn)象也經(jīng)細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)所驗(yàn)證。人源性乳牙牙髓干細(xì)胞在中等和高等彈性模量介質(zhì)表面培養(yǎng)時(shí),表達(dá)較高水平的牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1、牙本質(zhì)磷蛋白、牙本質(zhì)涎蛋白。結(jié)果表明,人源性乳牙牙髓干細(xì)胞隨著培養(yǎng)基質(zhì)硬度的增加其延展性及成牙本質(zhì)分化能力逐漸增強(qiáng),為未來牙組織工程提供方法借鑒。
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