三甲基氯化錫誘導(dǎo)的非洲綠猴腎細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)譜改變
關(guān)鍵詞：三甲基氯化錫 vero細(xì)胞 微管蛋白
摘要：目的分析三甲基氯化錫（trimethyhinchloride，TMT—C1）誘導(dǎo)的非洲綠猴腎細(xì)胞（vero細(xì)胞）和正常vero細(xì)胞之間差異表達(dá)蛋白質(zhì)，以尋找相關(guān)的標(biāo)志物，探討TMT—C1所致腎損傷的分子機(jī)制。方法通過(guò)雙向凝膠電泳和液相色譜一電噴霧線性離子阱質(zhì)譜技術(shù)比較TMT．C1染毒的vem細(xì)胞和正常veto細(xì)胞之間蛋白質(zhì)表達(dá)譜的差異，蛋白免疫印跡技術(shù)分析其中的2個(gè)差異蛋白AnnexinA1和et6-Tubulin的表達(dá)以驗(yàn)證雙向電泳的結(jié)果，反轉(zhuǎn)錄熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)進(jìn)一步分析AnnexinAl和僅6一Tubulin在mRNA水平的表達(dá)。結(jié)果比較TMT—C1染毒的vero細(xì)胞和正常vero細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)譜，共獲得15個(gè)差異蛋白點(diǎn)，9個(gè)通過(guò)質(zhì)譜分析得到鑒定，3個(gè)上調(diào)，6個(gè)下調(diào)。與對(duì)照組比較，各TMT．C1染毒組d6一Tubulin蛋白質(zhì)和mRNA表達(dá)水平均下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P〈O．01）。與對(duì)照組比較，各染毒劑量組AnnexinAl蛋白表達(dá)水平均上調(diào)，25和50p．μmol／L組mRNA表達(dá)水平下調(diào)，100μmol／L組的mRNA表達(dá)水平上調(diào)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P〈0．01）。結(jié)論雙向凝膠電泳結(jié)合質(zhì)譜分析篩選到的9個(gè)差異表達(dá)蛋白與TMT．C1所致腎細(xì)胞毒性密切相關(guān)，可作為早期診斷、治療及療效評(píng)價(jià)的候選生物標(biāo)志物。
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