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      阻遏矽肺纖維化的實(shí)驗(yàn)研究

      翁澤平; 鐘雪云; 張繼君; 劉薇薇; 陳娟; 劉移民; 余衛(wèi); 唐麗娟; 陳嘉榆; 方茅; 張程; 葉更新; 陳玲珍 廣州暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研室; 510632廣州; 廣州市第十二人民醫(yī)院; 廣州510632

      關(guān)鍵詞:肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子 髓樣組細(xì)胞 肺纖維化 羥脯氨酸 

      摘要:目的比較骨髓間充質(zhì)樣干細(xì)胞(BM+MSCs)與pcDNA3.1肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)轉(zhuǎn)染的BM—MSCs對(duì)SiO,所致大鼠肺泡炎和早期肺纖維化的影響并探討其機(jī)制。方法收集培養(yǎng)雄性Wistar幼鼠的原代BM-MSCs,并進(jìn)行4,6-聯(lián)脒-2-苯基吲哚(DAPI)標(biāo)記。將50只雄性Wistar大鼠氣管滴注40mg/mlSiO2,混懸液1ml造模后,隨機(jī)分為模型組、BM—MSCs組和pcDNA3.1-HGF+BM—MSCs組。造模次日,模型組(10只):尾靜脈注入PBS1ml;BM—MSCs組(20只):尾靜脈注入10^6/mlBM-MSCs1ml;pcD-NA3.1-HGF+BM-MSCs組(20只):尾靜脈注入10^6個(gè)/mlpcDNA3.1-HGF轉(zhuǎn)染的BM-MSCslm1。14和28d后,分別處死大鼠,取肺組織冰凍切片,熒光顯微鏡下檢測(cè)體內(nèi)DAPI標(biāo)記細(xì)胞;HE和Masson染色觀察肺炮炎和纖維化情況;免疫印跡(Westernblot)法測(cè)各組大鼠肺組織的I-IGF表達(dá)量;ELISA法檢測(cè)肺組織中腫瘤壞死因子(TNF).or.的含量,樣本堿水解法檢測(cè)肺組織中羥脯氨酸(HYP)的含量。結(jié)果14、28d時(shí),pcDNA3.1-HGF+BM-MSCs組肺組織肺泡炎評(píng)分(14d:1.16±0.3,28d:0.8+0.20)均低于同時(shí)期BM-SCs組(14d:1.68+0.17,28d:1.58±031)和模型組(14d:2.36+_0.17,28d:2.80_+0.14),BM—MSCs組肺泡炎評(píng)分均低于同時(shí)期模型組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.05)。14、28d時(shí)pcDNA3.1-HGF+BM~MSCs組肺纖維化評(píng)分(14d:0.10+_0.11,28d:1.16+_0.13)均明顯低于同時(shí)期BM—MSCs(14d:0.54+0.15,28d:1.36±0.13)和模型組(14d:0.64+0.09,28d:1.84+0.17),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈O.05)。14、28d時(shí)pcDNA3.1一HGF+BM—MSCs組肺組織勻漿中TNF—d含量[14d:(280.48+23.11)pg/mg,28d:(249.78_+22.33)pg/mg]均明顯低于BM—MSCs組[14d:(342.58_+35.34)pg/mg,28d:(319.5l±17.84)pg/mg]~模型組『14d:(442.29±36.76)pg/mg,28d?

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