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人H5N1流感病毒M1基因的亞克隆及其在原核細胞的表達
陳愛珺; 郭建強; 姚立紅; 程從升; 劉曉宇; 付金奇; 徐鵬衛(wèi); 張智清 中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所病毒基因工程國家重點實驗室; 北京100052
關鍵詞：流感病毒a型 基因 基因表達
摘要：目的 構建人H5N1亞型禽流感病毒A/Anhui/1/2005 M1蛋白的原核表達系統(tǒng)，為進一步研究M1蛋白的生物學功能和制備其診斷試劑奠定基礎。方法 以該病毒基因節(jié)段七cDNA為模板，PCR擴增得到M1基因片段。將該片段亞克隆至載體pQE80-L中，構建重組質粒pQE80-L/M1，轉化大腸埃希菌BL21（ DE3）。IPTG誘導重組蛋白表達。金屬鎳離子螯合層析純化N末端攜帶多聚組氨酸標簽的重組M1蛋白，免疫小鼠制備多克隆抗體。結果 獲得了重組M1蛋白，能與抗H5N1亞型流感病毒血清發(fā)生特異性結合，且其免疫后能誘導機體產生特異性抗體。結論 成功獲得了人H5N1亞型禽流感病毒M1蛋白在原核細胞中高效表達。
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