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關(guān)鍵詞:水稻 mapk蛋白質(zhì) 免疫印跡 逆境脅迫 過(guò)表達(dá)
摘要:促分裂原活化蛋白質(zhì)激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)在真核生物中高度保守,在水稻逆境應(yīng)答反應(yīng)中也發(fā)揮著重要作用。本研究表達(dá)純化了水稻OsMPK17蛋白質(zhì),制備了特異性抗體,對(duì)多種非生物逆境脅迫下的蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行免疫印跡分析,發(fā)現(xiàn)OsMPK17蛋白質(zhì)在干旱脅迫下誘導(dǎo)表達(dá),提示該蛋白質(zhì)在干旱脅迫應(yīng)答中發(fā)揮作用。對(duì)脫落酸和茉莉酸甲酯處理的離體葉片蛋白質(zhì)分析發(fā)現(xiàn),OsMPK17蛋白質(zhì)表達(dá)豐度下降,提示該蛋白質(zhì)的功能發(fā)揮可能受激素調(diào)控。為此,構(gòu)建了過(guò)表達(dá)OsMPK17蛋白質(zhì)的載體,轉(zhuǎn)化水稻后篩選獲得了OsMPK17蛋白質(zhì)過(guò)表達(dá)的純合株系。田間種植鑒定結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因株系的株高變矮、穗長(zhǎng)變短、結(jié)實(shí)率降低。種子萌發(fā)期擬旱(PEG-6000)處理?xiàng)l件下,過(guò)表達(dá)OsMPK17株系的種子長(zhǎng)勢(shì)明顯比野生型好,根長(zhǎng)與芽長(zhǎng)均顯著大于野生型。幼苗期失水試驗(yàn)表明,轉(zhuǎn)基因植株的失水率低于野生型。在土培干旱脅迫后恢復(fù)澆水的試驗(yàn)中,過(guò)表達(dá)OsMPK17蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因水稻生長(zhǎng)也好于野生型。綜上,過(guò)表達(dá)OsMPK17蛋白質(zhì)提高了水稻的耐旱性。本研究增進(jìn)了對(duì)水稻OsMPK17基因功能的了解。
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